Vol. 5# Núm. 1# Año 2025# Revista Impacto# ISSN 2789-861X Pág. 60 de 70
Artículo publicado en acceso abierto
bajo la Licencia CC BY 4.0.
Artículo de investigación
Antagonismo de Trichoderma spp. con Fusarium spp., para
posterior masificación en arroz como agente biocontrolador
Antagonism of Trichoderma spp. with Fusarium spp., for its later
mass production in rice as biocontrol agent
Belén Itatí Giménez Mieres* , Cynthia Meaurio , Ana Victoria Barrios
Universidad Nacional de Itapúa, Facultad de Ciencias y Tecnología, Encarnación, Paraguay
*Autor de correspondencia: Belén Itatí Giménez Mieres; belengimenez003@facyt.uni.edu.py
Recibido: 25/08/2025 Aceptado: 28/12/2025
Resumen
Trichoderma spp. es un grupo de hongos benéficos presentes en el suelo, que ha demostrado
potencial como agente de biocontrol. El objetivo de este trabajo fue determinar la eficacia de
Trichoderma spp. como agente biológico en control de Fusarium spp. y su masificación en
arroz para aplicaciones agrícolas. Se aislaron cepas nativas de Trichoderma spp. a partir de
muestras de suelo y se identificaron mediante características morfológicas. Se evaluó el
antagonismo in vitro con medio PDA, midiendo la inhibición del crecimiento micelial de
Fusarium spp. con Trichoderma spp. a 28 °C. Para la masificación, se utilizó arroz como
sustrato, el cual se inoculó y se incubó en condiciones controladas. Los resultados mostraron
una inhibición significativa del crecimiento de Fusarium spp., alcanzando porcentajes
superiores al 70% a las 72 horas. La colonización de Trichoderma spp. en el arroz fue
homogénea, con esporulación visible y color verde característico. Este estudio demuestra que
la utilización de Trichoderma spp. puede proporcionar una alternativa efectiva y sostenible
para el control de Fusarium spp., logrando una inhibición significativa en su crecimiento in vitro
y confirmando la viabilidad del arroz como sustrato económico para la producción de inóculo
en condiciones controladas.
Palabras clave: Trichoderma spp., antagonismo, Fusarium spp., masificación.
Abstract
Trichoderma spp. is a group of beneficial soil fungi that has shown potential as a biocontrol
agent. The object of this study was to determine the effectiveness of Trichoderma spp. as a
biological agent for controlling Fusarium spp., and its mass production in rice for agricultural
applications. Native strains of Trichoderma spp. were isolated from soil samples and identified
based on morphological characteristics. The in vitro antagonism was evaluated on PDA
medium by measuring the inhibition of Fusarium spp. mycelial growth by Trichoderma spp. at
28 °C. For mass production, rice was used as a substrate, which was inoculated and incubated
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under controlled conditions. The results showed significant inhibition of Fusarium spp. growth,
reaching percentages above 70% after 72 hours. Trichoderma spp. colonization on rice was
homogeneous, with visible sporulation and the characteristic green coloration. This study
demonstrates that the use of Trichoderma spp. can provide an effective and sustainable
alternative for controlling Fusarium spp., achieving significant inhibition of its in vitro growth
and confirming rice as an economical and viable substrate for inoculum production under
controlled conditions.
Keywords: Trichoderma spp., antagonism, Fusarium spp., massification.
1. Introducción
El género Trichoderma constituye un grupo de hongos filamentosos ampliamente distribuidos
en suelos agrícolas, reconocidos por su capacidad como agentes de control biológico frente
a patógenos fúngicos como Fusarium spp. Su eficacia deriva de mecanismos como la
antibiosis, mediante la producción de metabolitos antimicrobianos y el micoparasitismo, en el
cual, este hongo parasita y se alimenta de otros hongos patógenos (1, 2).
Trichoderma spp. produce compuestos como la 6-pentil-α-pirona, un metabolito con
propiedades antibióticas y antifúngicas que contribuye a inhibir el crecimiento de patógenos
como Fusarium spp. Además, estimula las defensas naturales de las plantas, promoviendo la
producción de enzimas y sustancias que fortalecen su resistencia frente a diversas
enfermedades, estimula un crecimiento más rápido de las raíces, lo que ayuda a la planta a
soportar mejor las situaciones de estrés y favorece su desarrollo general, así como la
activación de mecanismos de resistencia (3). En lugar de actuar directamente sobre los
microorganismos dañinos, estos procesos potencian las defensas fisiológicas y bioquímicas
propias de la planta (4). Estos atributos los posicionan como alternativas sostenibles a los
fungicidas químicos, representando más del 60% de los biofungicidas registrados a nivel
global (1).
Este organismo está presente de manera natural en la mayoría de los terrenos dedicados a
la agricultura. Destaca por su gran habilidad para adaptarse a distintos entornos, su elevada
capacidad de reproducción y su destreza para colonizar las raíces (5). Además, posee una
notable plasticidad ecológica y contribuye a estimular el crecimiento de los cultivos. Actúa
como un activador de la resistencia general de las plantas y puede parasitar una amplia
variedad de hongos que son patógenos para las plantas (6).
El aislamiento de cepas nativas se realiza desde la rizósfera, donde el hongo Trichoderma
establece interacciones simbióticas con las raíces. Para su aislamiento y crecimiento, los
protocolos estandarizados emplean técnicas de siembra en PDA (Agar Papa Dextrosa), el
cual es un medio que se puede obtener comercialmente o prepararlo en el laboratorio (7).
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Macroscópicamente, Trichoderma spp. se caracteriza por presentar un crecimiento micelial
aterciopelado cuyo color varía del blanco al verde, dependiendo del tiempo de incubación.
Además, la forma de crecimiento del micelio es un factor importante para su identificación, ya
que algunas especies muestran un crecimiento radial (8).
La evaluación del potencial biofungicida requiere pruebas de enfrentamiento dual en placas
de Petri, donde se mide la inhibición del crecimiento de patógenos como Fusarium spp. tras
72-96 horas de co-cultivo.
La masificación de cepas promisorias implica fermentación líquida o sólida, optimizando
parámetros como pH (4.8), tipo de inóculo (suspensiones de esporas) y sustratos económicos
(ej. residuos agrícolas). Este proceso permite obtener formulaciones estables para aplicación
agrícola, consolidando a Trichoderma como un pilar en el manejo integrado de enfermedades.
El objetivo de este trabajo fue determinar la eficacia de Trichoderma spp. aislado del suelo
como agente biológico para el control de Fusarium spp. y su masificación en sustrato de arroz
para futuras aplicaciones agrícolas.
2. Materiales y Métodos
2.1. Muestreo del suelo
Las muestras de suelo fueron obtenidas de la rizosfera (5-10 cm de profundidad) mediante el
uso de espátula estéril, recolectada en un campo privado destinado a la siembra de maíz. La
ubicación geográfica corresponde a latitud y longitud
27°15'14.5"S 55°42'13.2"W. En el lugar
se tomaron dos muestras de diferentes puntos de la propiedad con una distancia de 400 m
una de otra. Los recipientes utilizados fueron estériles y herméticos y las muestras se
mantuvieron a 4 °C durante 48 h para evitar la proliferación microbiana hasta el momento de
su utilización (7).
2.2. Aislamiento Trichoderma spp.
Los procedimientos se realizaron en el laboratorio de microbiología de la Facultad de Ciencias
y Tecnología de la Universidad Nacional de Itapúa.
El medio de cultivo PDA fue preparado utilizando 500 mL de agua destilada, 125 g de papa
sin pelar, 7 g de dextrosa y 15 g de agar-agar. Fue esterilizado en autoclave a 121°C durante
15 min. Utilizando un termómetro y observando que la temperatura descendió a 50°C y antes
de la gelificación, se añadió el antibiótico cloranfenicol diluido en etanol al 96% a una
concentración de 500 mg por litro de PDA (7). Inmediatamente después de la adición del
antibiótico, se realizó una agitación y el medio se vertió en placas de Petri para su solidificación
(2). El antibiótico fue agregado para evitar el crecimiento de bacterias no deseadas en las
placas. La siembra fue realizada mediante estriado superficial, bajo condiciones de aerobiosis,
sin requerimiento de CO.
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Para la identificación de Trichoderma spp. se utilizaron claves taxonómicas clásicas,
especialmente la de Rifai (1969), como se citó en Romero (2009) (9), para comparar las
características observadas con descripciones de especies conocidas. Se buscaron colonias
verdes en diferentes tonalidades (verde brillante, verde olivo, verde claro o azul-verdoso), que
se intensifican a medida que madura la colonia (10).
2.3. Prueba de Antagonismo con Fusarium spp.
La cepa aislada de Fusarium spp. fue donada por el laboratorio de Biología Molecular de la
Facultad de Ciencias y Tecnología.
Las placas de Petri fueron preparadas con medio PDA estéril, vertiéndose 10 mL por placa y
permitiendo la solidificación a temperatura ambiente. Se utilizaron placas de 6 cm de diámetro,
con micelio activo de ambos hongos, los cuales fueron extraídos de cultivos previamente
incubados durante 5 d en PDA.
Trichoderma spp. y Fusarium spp. fueron sembrados en extremos opuestos de una placa de
PDA, a 1 cm del borde, trazando una nea en el medio por la parte posterior para facilitar su
control (7).
En la placa control, únicamente Fusarium spp. fue sembrado para comparar su crecimiento
en ausencia del antagonista.
Las placas fueron incubadas a 28°C en condiciones aerobias, observándose diariamente el
crecimiento micelial de Fusarium spp. en presencia y ausencia de Trichoderma spp. Se
registró el momento de contacto entre las colonias. El crecimiento de la colonia se evaluó en
el medio PDA utilizando un calibrador vernier y las medidas fueron utilizadas para realizar el
análisis estadístico.
Se observó el crecimiento de la colonia en medios de cultivo PDA (Papa Dextrosa Agar),
evaluando el color, textura y velocidad de crecimiento.
El porcentaje de inhibición micelial fue calculado mediante la fórmula:


 (Ec. 1)
Donde: PICR= porcentaje de inhibición de crecimiento radial; C= crecimiento radial (mm) del
patógeno sin Trichoderma spp., T= crecimiento radial (mm) del patógeno con Trichoderma
spp. Un porcentaje elevado es indicativo de fuerte antagonismo (8, 11, 12).
2.4. Producción masiva de Trichoderma spp. en arroz
Se seleccionó arroz previamente lavado con agua potable para eliminar impurezas.
Posteriormente, el arroz fue dejado en reposo en agua durante 15 min para su hidratación.
Transcurrido este tiempo, el excedente de agua fue retirado mediante un colador y el arroz
fue esterilizado en matraces Erlenmeyer en autoclave a 121 °C durante 15 min. Se retiró de
la autoclave para que baje la temperatura del sustrato (13).
Una vez que descendió la temperatura se trabajó en cámara de flujo laminar y el arroz fue
cargado en bolsas con cierre hermético tipo Zip, agregando 250 g de arroz hidratado en cada
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bolsa. Para la masificación de Trichoderma spp. en dicho sustrato, se utilizó una de las placas
con PDA que contenía el microorganismo; la mitad del agar fue cortada y agregada
directamente a cada bolsa, agitándose para que las esporas de Trichoderma spp. se
distribuyan por todo el interior de la bolsa (10).
Las bolsas fueron dejadas en reposo en una estufa a oscuras a 28 °C durante 3 d en
condiciones herméticas, abriendo una vez al día una pequeña parte de la bolsa bajo el flujo
laminar para facilitar la aireación y permitir así el desarrollo del microorganismo.
2.5. Análisis estadístico
El crecimiento micelial de Fusarium spp. (mm) a las 72 h, en los grupos control y tratado con
Trichoderma spp. fue analizado en software Jamovi (versión 2.6.26). Se evaluó la normalidad
con la prueba de Shapiro-Wilk. Se aplicó la prueba t para muestras independientes, (T de
Welch) para comparar ambos grupos, considerando un nivel de significancia de p < 0.01.
3. Resultados y Discusión
3.1. Aislamiento e identificación de Trichoderma spp.
Se logró aislar Trichoderma spp. a partir de muestras de suelo provenientes de la rizosfera en
dos sitios distintos. Las colonias presentaron características morfológicas típicas, con
crecimiento y esporulación verde clara, lo que permitió su identificación preliminar como
Trichoderma spp.
El aislamiento exitoso de Trichoderma a partir de suelos agrícolas y domésticos confirma la
amplia distribución y adaptabilidad de este género en diversos ambientes, lo que facilita su
uso en estrategias de manejo integrado de enfermedades (12).
Trichoderma spp. se encuentra frecuentemente en la zona cercana a las raíces de diferentes
cultivos, demostrando una gran adaptabilidad al medio ambiente y una notable habilidad para
competir con otros microorganismos presentes en el suelo (14).
3.2. Prueba de antagonismo con Fusarium spp.
En la figura 1 se observa el crecimiento de Trichoderma spp. y Fusarium spp. en las placas
de petri. La Trichoderma spp. mostró un crecimiento rápido y competitivo frente a Fusarium
spp., inhibiendo significativamente el desarrollo micelial del patógeno. El contacto entre ambos
hongos ocurrió entre los días 2 y 3 de incubación, momento en el que se observó una clara
reducción del área de crecimiento de Fusarium spp. en comparación con el control sin
antagonista. Estos resultados evidencian la capacidad antagonista del aislado de Trichoderma
spp., posiblemente mediada por mecanismos como competencia por espacio y nutrientes,
producción de metabolitos inhibitorios y micoparasitismo.
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Figura 1. Antagonismo entre Trichoderma spp. y Fusarium spp. a las 72 h
Los resultados obtenidos en este estudio confirman la eficacia de Trichoderma spp. como
agente biocontrolador frente a Fusarium spp., alineándose con investigaciones recientes que
destacan el potencial antagonista de diversas especies de Trichoderma en diferentes cultivos
y condiciones de laboratorio (15).
En las pruebas de antagonismo in vitro, se observó una inhibición del crecimiento de Fusarium
spp., lo que coincide con estudios que reportan porcentajes de inhibición superiores al 60%
en ensayos similares, especialmente con especies como T. harzianum, T. atroviride y T.
asperellum (16).
Los resultados aquí presentados son consistentes con investigaciones recientes que reportan
la capacidad de Trichoderma spp. para reducir la incidencia de enfermedades causadas por
Fusarium en diferentes cultivos, como arroz, guisante, soja y cereales. Por ejemplo, se ha
documentado que la aplicación de Trichoderma puede disminuir la incidencia de la marchitez
por Fusarium hasta en un 72%, además de reducir la producción de micotoxinas peligrosas
como deoxinivalenol y zearalenona (17).
En la tabla 1 se presentan los resultados de los porcentajes de inhibición de crecimiento
micelial obtenidos (Ec. 1).
Tabla 1. Porcentaje de inhibición de crecimiento micelial
Placas
% 48h
% 72h
1
63.46
73.38
2
47.31
63.67
3
85.01
94.02
4
70.52
79.14
5
39.59
63.96
6
82.31
88.92
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La mayoría de las investigaciones señalan que el porcentaje de inhibición del crecimiento
radial (PICR) de Fusarium por Trichoderma supera habitualmente el 50% en cultivos duales
in vitro. Se han documentado valores de inhibición que van desde el 16% hasta cifras
superiores al 90%, dependiendo de la cepa utilizada (18).
3.3. Análisis estadístico
En la Tabla 2 se observa que no fue posible evaluar la normalidad en el grupo Control (N=1).
Para el grupo Tratamiento (N=6), la prueba de Shapiro-Wilk (W=0.878, p=0.258) indica que
los datos cumplen con el supuesto de normalidad (p>0.05), requerido para análisis
estadísticos paramétricos.
Tabla 2. Estadística descriptiva
Shapiro-Wilk
Grupo
N
Media
DE
Mín
Máx
W
P
Control
1
27.80
27.80
0.00
27.80
27.8
NaN
NaN
Tratamiento
6
6.60
6.60
3.14
3.08
10.1
0.878
0.258
Figura 2. Crecimiento de Fusarium spp. control y Fusarium spp. con el antagonista.
Las pruebas presentadas en la Tabla 3 muestran diferencias significativas entre los grupos
para el crecimiento (p < 0.001 en todas las pruebas).
Tabla 3. Prueba t para Muestras Independientes
Estadístico
gl
P
Crecimiento Fusarium spp. (mm)
T de Welch
16.6
5.00
<.001
Hₐ μControl ≠ μTratamiento
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Las pruebas estadísticas indicaron que el tratamiento con Trichoderma spp. tuvo un efecto
significativamente inhibitorio sobre Fusarium spp., con un nivel de significancia p < 0.001, lo
que indica un efecto biocontrolador significativo.
3.4. Masificación de Trichoderma spp. en arroz
La inoculación con el hongo sobre el sustrato de arroz esterilizado permitió su colonización
homogénea tras varios as de incubación a 28 °C en oscuridad. La esporulación fue visible
a simple vista, con un color verde característico que indica un buen desarrollo del hongo en el
sustrato. Esta masificación confirma la viabilidad del arroz como medio económico y efectivo
para la producción de inóculo viable de Trichoderma spp.
La masificación de Trichoderma spp. en arroz, como se realizó en este trabajo, ha demostrado
ser una estrategia eficiente y económica para la producción de inóculo viable, facilitando su
aplicación a escala agrícola.
Diversos estudios recientes han evaluado diferentes sustratos para la multiplicación masiva
de Trichoderma, encontrando que el arroz y sus derivados (arroz integral, salvado de arroz)
permiten una colonización homogénea y una alta esporulación, aunque otros sustratos como
sorgo y mijo también muestran buenos resultados (19).
Asimismo, el uso de preparados de Trichoderma elaborados a partir de arroz ha mostrado
una mayor eficiencia en comparación con ciertos fungicidas comerciales para proteger cultivos
como garbanzo y trigo, logrando aumentar la producción y disminuir la intensidad de las
enfermedades (20).
La elección del sustrato depende de la disponibilidad local y el costo, pero el arroz sigue
siendo una opción ampliamente utilizada por su accesibilidad y eficacia.
Figura 3. Masificación de Trichoderma spp. en arroz a las 72 h
4. Conclusiones
La investigación confirma que Trichoderma spp. aislado del suelo posee un fuerte efecto
antagonista contra Fusarium spp., evidenciado por una alta inhibición del crecimiento micelial
en condiciones in vitro. Además, la masificación del hongo en sustrato de arroz demostró ser
una estrategia eficiente y económica para producir inóculo viable, facilitando su aplicación a
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escala agrícola. Estos resultados sustentan el uso de Trichoderma spp. como un
biocontrolador sostenible y una alternativa prometedora para la gestión integrada de
enfermedades fúngicas en cultivos, promoviendo la reducción del uso de fungicidas qmicos
y contribuyendo a prácticas agrícolas más amigables con el ambiente.
Contribución de los autores: Conceptualización, B. G., C. M., y A. B.; diseño metodológico,
B. G.; aplicación de instrumentos, B. G.; análisis de datos, C. M.; redacción y preparación del
manuscrito, B. G., C, M., y A. B.
Conflicto de interés: Los autores declaran que no existe ningún conflicto de interés con
respecto a la publicación de este artículo.
Agradecimientos: A todo el equipo humano del Laboratorio de Biología Molecular de la
Facultad de Ciencias y Tecnología por la colaboración en este proyecto.
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